【血癌治療】數碼滴液PCR化驗技術助監測病情、治療成效、復發徵兆　比傳統檢測方法靈敏度高百倍

By Giann on 06 Oct 2022

Deputy Managing Editor

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血癌乃香港十大致命癌症之一，每年有數以千計新確診者。現今醫學科技發達，血癌患者可透過基因測試，診斷及分析基因突變的類別，從而找出適合的治療方法。

血癌分為3大類，分別為急性及慢性白血病（acute and chronic leukaemia，簡稱AML）、「淋巴癌」（lymphoma）及骨髓癌（myeloma）。其中急性骨髓性白血病是惡化得最快的一類，癌細胞可在數周甚至數日內迅速增長並惡化，而病人在5年內存活率平均僅三成。為了找出適合的治療方法，同時評估預後，現時血癌患者可透過基因測試，診斷及分析基因突變的類別。

例如病人若屬於PML::RARA、RUNX1::RUNX1T1或CBFB::MYH11融合基因，預後較佳；如屬FLT-3基因突變，預後會較差，處方化療時配合藥物以加強療效，同時建議病人病情緩解後，安排接受「異體血幹細胞移植」。

Photo from 養和醫療集團

MRD檢測成指導血癌治療新標準

雖然血癌現時「有得醫」，但復發是白血病化學治療最常見治療失敗的原因。養和醫院綜合腫瘤科中心主任、血液及血液腫瘤科專科醫生梁憲孫表示，患者在接受治療後，仍可能殘留微量的癌細胞，惟傳統顯微鏡檢測方法靈敏性及準確度不夠高，醫生較難掌握病人是否已經完全康復。而檢測微量殘存疾病（Minimal residual disease, MRD）則有助監測化療或標靶藥的效用或及早偵測復發徵兆，並判斷是否需採取進一步的治療方案，例如骨髓移植等等。現時準確偵測微量癌細胞水平已成指導血癌治療的國際新標準。

偵測MRD有4大方法　數碼滴液PCR靈敏度高

那怎樣才可掌握殘存的微量癌細胞（MRD）的數據呢？現時方法主要有4個方法。一般採用細胞分析，即流式細胞測試（Multiparametric
flow cytometry）；或分子學分析，包括：新一代基因排序系統（NGS）、定量PCR（RQ-PCR），及數碼滴液聚合酶鏈式反應測試（Droplet DigitalPCR, ddPCR）。

養和醫院臨牀病理科及分子病理科主任、血液學專科醫生馬紹鈞醫生解釋，數碼滴液PCR技術是一種PCR技術，會將個別DNA分子分隔在滴液（droplet）內，然後進行PCR及在每個滴液量度訊號，特別適用於測試微量分子數目，其靈敏度很高，可於10萬個細胞中偵測到一個癌細胞。

而在採用數碼滴液PCR技術為病人進行測試時，並非採用現成的測試劑液，而是因應患者體內變異基因的種類，度身設計檢測試劑。其操作流程簡述如下：醫護人員會先為病人抽取血液或骨髓樣本，然後由結合ddPCR反應溶液，將其分隔成滴液，每一滴內不能超過一條基因並進行PCR病理分析，基因結果為零或一（即數碼式），顯示是否存在微量癌細胞，從而量度患者體内微量癌細胞的水平。

相關的病理分析為白血病治療提供準確的科學數據，對療程中及癒後的監察提供重要的指導作用。

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數碼滴液PCR有效監測治療效用、復發徵兆

養和醫療集團是本港首間採用數碼滴液PCR技術，以監測白血病患者病情變化的私家醫院。過去四年，已為118名出現基因突變的白血病患者採用此技術監測、追蹤他們的微量癌細胞水平及基因變異情況，當中113名為急性骨髓性白血病病人，3名為急性淋巴性白血病病人，慢性骨髓性白血病及淋巴瘤病人各1名。

在118名病人中，偵測到79種基因變異，當中有八成半是基因突變（包括67種變異基因），而餘下15%涉及12種融合基因。這些數據均有助病人治療，包括量化深度完全緩解、準確預後、預警復發、決定與否進行栘植。

以下為其中3宗個案，顯示數碼滴液PCR如何監察病人預後狀況。

個案一：58歲女性，患有NPM1+ FLT3-ITD+急性骨髓性白血病，染色體正常。接受化療後完全緩解。因為她的NPM1基因突變不是常見類型，養和為她度身訂造數碼滴液PCR測試用作MRD監察，結果發現病人可達至MRD陰性，及維持一年多，她的預後是比較樂觀。

個案二：53歲男性，患有慢性骨髓性白血病，攜帶有費城染色體及BCR::ABL1融合基因，惟其BCR斷點罕見，未能以常規定量PCR來量度MRD。養和為他度身訂造數碼滴液PCR測試用作MRD監察。結果發現病人在用第一代CML標靶藥反應未如理想，並且在用藥12個月時融合基因拷貝比先前升了5倍，及同時發現對第一代CML標靶藥產生抗藥性。醫生為病人轉了第二代CML標靶藥，服後反應良好，在用藥第6個月時已達至深度緩解。

個案三：58歲男性，患有NPM1+ FLT3-ITD+急性骨髓性白血病，染色體正常，NPM1基因突變是常見type A類型。接受化療後完全緩解，並且進行了半相合骨髓移植。可惜移植後一年用數碼滴液PCR偵測到MRD陽性，並在MRD結果指導下進行了一系列治療，更曾一度達至MRD陰性。可惜最後MRD還是節節攀升，及後血癌全面復發。